Conjugation Vector Delivery System for Molecular Cloning into Cells of Bacteria of The Genus  Bacillus

A. S. Gurinovich; Гуринович А. С.; I. A. Fedyushko; Федюшко И. А.; М. А. Titok; Титок М. А.

doi:10.31857/S0555109923060065

Конъюгационная система доставки векторов для молекулярного клонирования в клетки бактерий рода Bacillus

Авторы: Гуринович А.С.¹, Федюшко И.А.¹, Титок М.А.¹
Учреждения:
1. Белорусский государственный университет, биологический факультет, кафедра микробиологии
Выпуск: Том 59, № 6 (2023)
Страницы: 581-588
Раздел: Статьи
URL: https://jdigitaldiagnostics.com/0555-1099/article/view/674588
DOI: https://doi.org/10.31857/S0555109923060065
EDN: https://elibrary.ru/CVNJOP
ID: 674588

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ
Доступ закрыт

Доступ предоставлен
Доступ закрыт

Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация
Об авторах
Список литературы
Дополнительные файлы
Статистика

Аннотация

Разработана система доставки векторов для молекулярного клонирования в клетки бактерий рода Bacillus. Особенность созданной системы заключается в использовании плазмиды pBS72, обеспечивающей конъюгационный перенос полученного условно летального вектора pKS1mob в клетки исследуемых бактерий. Способность вектора pKS1mob реплицироваться в клетках Escherichia coli и B. subtilis при пониженной температуре (30°C), наличие двух полилинкеров вокруг гена канамицинрезистентности позволяет клонировать в его состав фрагменты целевых генов с использованием традиционных генно-инженерных подходов. Инактивация гена rok в плазмиде pBS72 позволила с высокой эффективностью трансформировать содержащий ее штамм сконструированным вектором pKS1mob. Скрещивание донорного штамма B. subtilis 168, содержащего конъюгативную pBS72 и мобилизуемую pKS1mob плазмиды, со штаммом-реципиентом рода Bacillus позволило ввести в него плазмиду pKS1mob. Показана возможность использования созданной системы для инактивации гена codY бактерий Bacillus licheniformis.

Ключевые слова

B. subtilis, плазмида pBS72, Rok белок, вектор pKS1mob, конъюгационный перенос, компетентность

Список литературы

Harwood C.R., Mouillon J.M., Pohl S., Arnau J. // FEMS Microbiol. Rev. 2018. V. 42. P. 721–738. https://doi.org/10.1093/femsre/fuy028
Burton A.T., Kearns D.B. // J. Bacteriol. 2020. V. 202. № 18. P. e00290-20. https://doi.org/10.1128/JB.00290-20
Singh P.K., Ramachandran G., Duran-Alcalde L., Alonso C., Wu L.J., Meijer W.J. // Environ. Microbiol. 2012. V. 14. № 10. P. 2812–2825. https://doi.org/10.1111/j.1462-2920.2012.02819x
Jeong D.E., Kim M.S., Kim H.R., Choi S.K. // Front. Microbiol. 2022. V. 13. P. 802040. https://doi.org/10.3389/fmicb.2022.802040
Brophy J.A.N., Triassi A.J., Adams B.L. // Nat. Microbiol. 2018. V. 3. P. 1043–1053. https://doi.org/10.1038/s41564-018-0216-5
Gurinovich A.S., Titok M.A. // Microbiology. 2022. V. 91. № 4. P. 395–408. https://doi.org/10.1134/S002626172230018X
Titok M.A., Chapuis J., Selezneva Y.V., Lagodich A.V., Prokulevich V.A., Ehrlich S.D., Jannière L. // Plasmid. 2003. V. 49. № 1. P. 53–62. https://doi.org/10.1016/s0147-619x(02)00109-9
Gurinovich A.S., Titok M.A. // Microbiology. 2020. V. 89. № 6. P. 660–669. https://doi.org/10.1134/S0026261720060065
Shatalin K.Y., Neyfakh A.A. // FEMS Microbiology Letters. 2005. V. 245. № 2. P. 315–319. https://doi.org/10.1016/j.femsle.2005.03.029
Harwood C.R., Cutting S.M. Molecular Biological Methods for Bacillus. / Ed. C.R. Harwood and S.M. Cutting Chichester, New York: Wiley, 1990. 581 p.
Anagnostopoulos C., Spizizen J. // J. Bacteriol. 1961. V. 81. № 5. P. 741–746. https://doi.org/10.1128/jb.81.5.741-746.1961
te Riele H., Michel B., Ehrlich S.D. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. V. 83. P. 2541–2545. https://doi.org/10.1073/pnas.83.8.2541
Sambrook J., Fritsch E., Maniatis T. Molecular Cloning: a Laboratory Manual, 2nd Ed. N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989. 468 p.
Poluektova E.U., Fedorina E.A., Lotareva O.V., Prozorov A.A. // Plasmid. 2004. V. 52. P. 212–217. https://doi.org/10.1016/j.plasmid.2004.07.001
Fujita Y, Satomura T, Tojo S, Hirooka K. // J. Bacteriol. 2014. V. 196. P. 3793–3806. https://doi.org/10.1128/JB.02055-14
Hoa T.T., Tortosa P., Albano M., Dubnau D. // Mol. Microbiol. 2002. V. 43. № 1. P. 15–26. https://doi.org/10.1046/j.1365-2958.2002.02727.x
Smits W.K., Grossman A.D. // PLoS Genet. 2010. V. 11. № 6. P. e1001207. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1001207